Video: Ինչպե՞ս է PCR դերը դիդեօքսի ԴՆԹ-ի հաջորդականության մեջ:
2024 Հեղինակ: Stanley Ellington | [email protected]. Վերջին փոփոխված: 2023-12-16 00:18
Ինչպես է PCR-ն խաղում ա դերը դիդեօքսի ԴՆԹ-ի հաջորդականության մեջ ? -ի օգտագործումը PCR թույլ է տալիս նկատելի մակարդակներ ԴՆԹ սինթեզ կաղապարի շատ ավելի ցածր մակարդակներից ԴՆԹ . Ինչու է ընթացքում դիդեօքսինուկլեոտիդի ընդգրկումը ԴՆԹ -ի հաջորդականացում ճանաչվե՞լ է որպես «վերարտադրման ավարտող» իրադարձություն:
Նաև պետք է իմանալ, թե ինչու է PCR օգտագործվում ԴՆԹ-ի հաջորդականացման գործընթացում:
PCR հանդես է գալիս Պոլիմերազային շղթայական ռեակցիա , իսկ կարճ ասած՝ պատճենում է ԴՆԹ միլիոնավոր անգամներ շատ արագ: Դա է օգտագործված մեջ ԴՆԹ -ի հաջորդականացում քանի որ երբեմն ԴՆԹ նմուշը չափազանց փոքր է: Դա տեղի է ունենում, օրինակ, հանցագործության վայրի ապացույցներում կամ շատ հին նմուշներում (օրինակ՝ մումիաներում):
Նմանապես, ի՞նչ է դիդեօքսի հաջորդականությունը: ԴՆԹ հաջորդականություն ճշգրիտի որոշումն է հաջորդականություն նուկլեոտիդներ ԴՆԹ-ի նմուշում: Դա անելու ամենատարածված մեթոդը կոչվում է դիդեօքսի մեթոդ կամ Սանգերի մեթոդ (կոչվել է իր գյուտարար Ֆրեդերիկ Սանգերի անունով, ով 1980 թվականին արժանացել է քիմիայի Նոբելյան մրցանակին [նրա երկրորդը] այս նվաճման համար)։
Այս առնչությամբ ո՞րն է դիդեօքսինուկլեոտիդի դերը ԴՆԹ-ի հաջորդականության մեջ:
Դիդեօքսինուկլեոտիդներ շղթայի երկարացման արգելակիչներ են ԴՆԹ պոլիմերազ, որն օգտագործվում է Սենգեր մեթոդի համար ԴՆԹ -ի հաջորդականացում . Դիդօքսիռիբոնուկլեոտիդները չունեն 3' հիդրօքսիլ խումբ, հետևաբար շղթայի հետագա երկարացում չի կարող տեղի ունենալ, երբ դա տեղի ունենա: դիդեօքսինուկլեոտիդ շղթայի վրա է. Սա կարող է հանգեցնել դադարեցման ԴՆԹ-ի հաջորդականությունը.
Ո՞րն է Ddntp-ի գործառույթը ԴՆԹ-ի հաջորդականության մեջ:
ա. Նրանք գործում են որպես այբբենարան ԴՆԹ պոլիմերազ.
Խորհուրդ ենք տալիս:
Ինչպե՞ս է գործում Sanger ԴՆԹ-ի հաջորդականությունը:
Sanger- ի հաջորդականացումը հանգեցնում է տարբեր երկարությունների երկարացման արտադրանքի ձևավորմանը, որը 3 'վերջում դադարում է դիդեօքսինուկլեոտիդներով: Ընդլայնման արտադրանքներն այնուհետև առանձնացվում են մազանոթային էլեկտրոֆորեզով կամ CE-ով: Մոլեկուլները էլեկտրական հոսանքով ներարկվում են գել պոլիմերով լցված երկար ապակյա մազանոթի մեջ
Ո՞րն է DdNTP-ի գործառույթը ԴՆԹ-ի հաջորդականության մեջ:
DdNTP-ն ներառում է ddATP, ddTTP, ddCTP և ddGTP: DdNTP-ն օգտակար է ԴՆԹ-ի կառուցվածքի վերլուծության համար, քանի որ այն դադարեցնում է ԴՆԹ-ի շղթայի պոլիմերացումը ԴՆԹ-ի վերարտադրության ժամանակ՝ առաջացնելով տարբեր երկարությունների ԴՆԹ շղթաներ, որոնք վերարտադրվում են կաղապարային շղթայից:
Ինչու է գլյուկոզան օգտագործվում պլազմիդային ԴՆԹ-ի մեկուսացման մեջ:
Այս քայլի նպատակն է մեծացնել բջիջների մեկնարկային ծավալը, որպեսզի ավելի շատ պլազմիդային ԴՆԹ հնարավոր լինի մեկուսացնել մեկ նախապատրաստման ընթացքում: Գլյուկոզա ավելացվում է բջիջներից դուրս օսմոտիկ ճնշումը բարձրացնելու համար։ Տրիսը բուֆերային նյութ է, որն օգտագործվում է հաստատուն pH (= 8.0) պահպանելու համար:
Ո՞րն է գործողությունների հաջորդականության նպատակը:
Ինչպես սահմանված է PMP սերտիֆիկացման դասընթացում, հաջորդական գործողությունները ծրագրի գործողությունների միջև հարաբերությունների բացահայտման և փաստաթղթավորման գործընթացն է: Այսպիսով, հաջորդական գործողությունների գործընթացի հիմնական նպատակը գործողությունների փոխկապակցվածության վերջնականացումն է՝ ծրագրի շրջանակն ավարտելու և ծրագրի նպատակներին հասնելու համար:
Ո՞րն է տարբերությունը Sanger-ի հաջորդականության և հաջորդ սերնդի հաջորդականության միջև:
Հաջորդ սերնդի հաջորդականության (NGS) տեխնոլոգիաները նման են: Sangersequencing-ի և NGS-ի միջև կրիտիկական տարբերությունը հաջորդականության ծավալն է: Թեև Սենջերի մեթոդը հաջորդականացնում է միայն մեկ ԴՆԹ-ի հատվածը յուրաքանչյուր անգամ, NGS-ը զանգվածաբար զուգահեռ է, յուրաքանչյուր վազքի ընթացքում միաժամանակ հաջորդականացնում է միլիոնավոր հատվածներ: