Բովանդակություն:

Ինչպե՞ս եք գենը մտցնում պլազմիդի մեջ:
Ինչպե՞ս եք գենը մտցնում պլազմիդի մեջ:

Video: Ինչպե՞ս եք գենը մտցնում պլազմիդի մեջ:

Video: Ինչպե՞ս եք գենը մտցնում պլազմիդի մեջ:
Video: Научу готовить курицу в соли Нежнее курицы я не ел ! Рецепт от шефа 2024, Մայիս
Anonim

Հիմնական քայլերն են

  1. Կտրեք բացեք պլազմիդ և «կպցնել» մեջ գեն . Այս գործընթացը հիմնված է սահմանափակող ֆերմենտների (որոնք կտրում են ԴՆԹ-ն) և ԴՆԹ լիգազի (որը միանում է ԴՆԹ-ին):
  2. Տեղադրեք որ պլազմիդ մեջ մանրէներ:
  3. Մեծանալ շատ պլազմիդ - բակտերիաներ կրող և դրանք որպես «գործարաններ» օգտագործել սպիտակուցը պատրաստելու համար:

Բացի այդ, ինչպե՞ս կարող է գենը տեղադրվել պլազմիդային GCSE-ի մեջ:

դա է տեղադրվում է պլազմիդի մեջ օգտագործելով լիգազի ֆերմենտներ: որ պլազմիդ գնում է մեջ բակտերիալ բջիջ: տրանսգենային բակտերիան բազմանում է, արդյունքում մեջ միլիոնավոր միանման բակտերիաներ, որոնք արտադրում են մարդու ինսուլին:

Բացի այդ, ինչպե՞ս եք ենթակլոնավորել գենը: Հիմնական քայլերը Ենթակլոնավորում Դուք ազատում և մաքրում եք ձեր ներդիրը մայր վեկտորից, կապում եք այս ներդիրը պատրաստված նպատակակետ վեկտորի մեջ, փոխակերպում այս կապակցման ռեակցիան իրավասու բակտերիալ բջիջների: Այնուհետև դուք ցուցադրում եք փոխակերպված բջիջները ներդիրի համար:

Հաշվի առնելով սա՝ որո՞նք են գեների կլոնավորման 4 քայլերը:

Դասական սահմանափակող ֆերմենտի մարսողության և կապակցման կլոնավորման արձանագրություններում ԴՆԹ-ի ցանկացած հատվածի կլոնավորումը հիմնականում ներառում է չորս քայլ

  • հետաքրքրություն ներկայացնող ԴՆԹ-ի (կամ թիրախային ԴՆԹ-ի) մեկուսացում,
  • կապակցում,
  • տրանսֆեկցիա (կամ փոխակերպում) և.
  • ցուցադրման/ընտրության ընթացակարգ:

Ինչպե՞ս եք ուժեղացնում պլազմիդը:

Փորձարարական ընթացակարգ

  1. Գործարկեք PCR և մաքրեք PCR արտադրանքը. Գործարկեք PCR՝ ձեր ներդիրի ԴՆԹ-ն ուժեղացնելու համար:
  2. Մարսեք ձեր ԴՆԹ-ն.
  3. Մեկուսացրեք ձեր ներդիրը և վեկտորը գելային մաքրման միջոցով.
  4. Միացրեք ձեր ներդիրը ձեր վեկտորի մեջ.
  5. Փոխակերպում:
  6. Մեկուսացրեք պատրաստի պլազմիդը.
  7. Ստուգեք ձեր պլազմիդը հաջորդականությամբ.

Խորհուրդ ենք տալիս: