Ո՞րն է ddNTP-ների օգտագործման նպատակը:
Ո՞րն է ddNTP-ների օգտագործման նպատակը:

Video: Ո՞րն է ddNTP-ների օգտագործման նպատակը:

Video: Ո՞րն է ddNTP-ների օգտագործման նպատակը:
Video: vorn e amenen | Ո՞րն Է Ամէնէն Կարեւորը 2024, Նոյեմբեր
Anonim

DdNTP վերաբերում է Դիդեօքսինուկլեոտիդներ Տրիֆոսֆատներ, որոնք օգտագործվում են Sanger դիդեօքսի մեթոդով ԴՆԹ-ի հաջորդականության համար տարբեր երկարությունների ԴՆԹ շղթաներ արտադրելու համար: Սա հանգեցնում է ԴՆԹ-ի պոլիմերացման (կամ ԴՆԹ-ի երկարացման) գործընթացի դադարեցմանը, քանի որ այս գործընթացը շարունակելու համար անհրաժեշտ է 3'-OH խումբ:

Հետևաբար, ինչու են ddNTP-ները օգտագործվում հաջորդականության մեջ:

Դիդեօքսինուկլեոտիդներ ԴՆԹ պոլիմերազի շղթայի երկարացման ինհիբիտորներ են, օգտագործված ԴՆԹ-ի համար Սանգերի մեթոդով հաջորդականություն . Դիդօքսիռիբոնուկլեոտիդները չունեն 3' հիդրօքսիլ խումբ, հետևաբար շղթայի հետագա երկարացում չի կարող տեղի ունենալ, երբ այս դիդեօքսինուկլեոտիդը շղթայի վրա է: Սա կարող է հանգեցնել ԴՆԹ-ի դադարեցմանը հաջորդականություն.

Նմանապես, ddNTP-ները միանում են dNTP-ներին: Մեկը կամ մի քանիսը dNTP-ներ ռադիոակտիվ կերպով պիտակավորված են՝ օգնելու պատկերացնել վերարտադրության արտադրանքը: Ի վերջո, յուրաքանչյուր խողովակ ստանում է չորս հատուկ նուկլեոտիդներից մեկը, որը կոչվում է դիօքսինուկլեոտիդներ ( ddNTP-ներ ) Այնուամենայնիվ, երբ ընդգրկված է, ԴՆԹ պոլիմերազը չի կարող հետագայում երկարացնել շղթան, քանի որ դրա համար անհրաժեշտ է 3'-OH: կցել հաջորդ նուկլեոտիդին:

Նմանապես կարելի է հարցնել՝ ինչպե՞ս են ddNTP-ները դադարեցնում հաջորդականության ռեակցիան:

Երբ առկա է փոքր քանակությամբ հաջորդականության ռեակցիաներ , դիդեօքսիռիբոնուկլեոզիդ տրիֆոսֆատներ ( ddNTP-ներ ) դադարեցնել հաջորդականության ռեակցիա աճող ԴՆԹ-ի շղթաների տարբեր դիրքերում: ddNTP-ները դադարեցնում են հաջորդականության ռեակցիան որովհետև դրանք՝ առաջացնում են ԴՆԹ պոլիմերազի անկում կաղապարի շղթայից: գ.

Ի՞նչ տեխնիկա կարող է օգտագործվել դիդեօքսինուկլեոտիդների հետ կապված:

Սանգերի հաջորդականությունը ա մեթոդ ԴՆԹ-ի հաջորդականությունը՝ հիմնված շղթայի վերջավորության ընտրովի ընդգրկման վրա դիօքսինուկլեոտիդներ ԴՆԹ պոլիմերազի միջոցով in vitro ԴՆԹ-ի վերարտադրության ժամանակ: Այն մշակվել է Ֆրեդերիկ Սանգերի և գործընկերների կողմից 1977 թվականին, այն ամենալայնն էր օգտագործված հաջորդականություն մեթոդ մոտավորապես 40 տարի:

Խորհուրդ ենք տալիս: