2025 Հեղինակ: Stanley Ellington | [email protected]. Վերջին փոփոխված: 2025-01-22 16:01
Բակտերիան օգտագործում է ա սահմանափակող ֆերմենտ դեպի պաշտպանել բակտերիալ վիրուսներից, որոնք կոչվում են բակտերիոֆագներ կամ ֆագեր: Երբ ֆագը վարակում է բակտերիան, այն ներդնում է այն ԴՆԹ բակտերիաների բջիջի մեջ, որպեսզի այն կարողանա վերարտադրվել: Այն սահմանափակող ֆերմենտ կանխում է ֆագի վերարտադրությունը ԴՆԹ այն շատ կտորների կտրելով։
Ի՞նչ են անում սահմանափակող ֆերմենտները ԴՆԹ-ի հետ:
Սահմանափակող ֆերմենտներ . Լաբորատորիայում, սահմանափակող ֆերմենտներ (կամ սահմանափակող էնդոնուկլեազներ ) օգտագործվում են կտրելու համար ԴՆԹ ավելի փոքր բեկորների մեջ: Կտրումները միշտ կատարվում են հատուկ նուկլեոտիդային հաջորդականությամբ: Տարբերվող սահմանափակող ֆերմենտներ ճանաչել և կտրել տարբեր ԴՆԹ հաջորդականություններ.
Կարելի է նաև հարցնել՝ ինչո՞ւ սահմանափակող ֆերմենտները չեն կտրում բակտերիալ ԴՆԹ-ն: Բակտերիաներ ունենալ սահմանափակող ֆերմենտներ , Կոչվում է նաեւ սահմանափակող էնդոնուկլեազներ , որը կտրել կրկնակի շղթայված ԴՆԹ կոնկրետ կետերում բեկորների մեջ: Հետաքրքիր է, սահմանափակող ֆերմենտներ մի բաժանեք իրենցը ԴՆԹ . Բակտերիաներ կանխել իրենց սեփականը ԴՆԹ from chop down by սահմանափակող ֆերմենտ -ի մետիլացման միջոցով սահմանափակում կայքեր.
Բացի այդ, ինչպե՞ս են սահմանափակող ֆերմենտները գտնում և կտրում ԴՆԹ-ն:
Ա սահմանափակող ֆերմենտ է ԴՆԹ - կտրող ֆերմենտ որը ճանաչում է կոնկրետ կայքերը ԴՆԹ . Շատերը սահմանափակող ֆերմենտները ստեղծում են երերուն կրճատումներ դրանց ճանաչման վայրերում կամ մոտակայքում՝ առաջացնելով ծայրեր միաշղթա ելուստով: Եթե երկու ԴՆԹ մոլեկուլները ունեն համապատասխան ծայրեր, դրանք կարող են միանալ ֆերմենտ ԴՆԹ լիգազի.
Ինչպե՞ս եք ընտրում սահմանափակող ֆերմենտները:
Սահմանափակող ֆերմենտներ ընտրելիս ցանկանում եք ընտրել ֆերմենտներ, որոնք
- Կտրեք ձեր ներդիրը, բայց մի կտրեք ձեր ներդիրի ներսում:
- Ձեր ստացող պլազմիդի ցանկալի վայրում են (սովորաբար Բազմակի կլոնավորման վայրում (MCS)), բայց մի կտրեք պլազմիդի այլ տեղ:
Խորհուրդ ենք տալիս:
Ինչու՞ են սահմանափակող ֆերմենտները կարևոր մոլեկուլային կենսաբանության մեջ:
Սահմանափակող ֆերմենտները բակտերիաներից մեկուսացված ֆերմենտներ են, որոնք ճանաչում են ԴՆԹ-ի հատուկ հաջորդականությունները և այնուհետև կտրում ԴՆԹ-ն՝ առաջացնելու բեկորներ, որոնք կոչվում են սահմանափակող բեկորներ: Սահմանափակող ֆերմենտները շատ կարևոր դեր են խաղում ԴՆԹ -ի ռեկոմբինանտ մոլեկուլների կառուցման գործում, ինչպես դա արվում է գենի կլոնավորման փորձերի ժամանակ
Ինչի՞ համար են օգտագործվում բնության մեջ սահմանափակող ֆերմենտները:
Սահմանափակող ֆերմենտ, որը նաև կոչվում է սահմանափակող էնդոնուկլեազ, բակտերիաների կողմից արտադրվող սպիտակուց, որը կտրում է ԴՆԹ-ն մոլեկուլի երկայնքով հատուկ վայրերում: Բակտերիաների բջիջում սահմանափակող ֆերմենտները կտրում են օտար ԴՆԹ-ն՝ այդպիսով վերացնելով վարակիչ օրգանիզմները
Կարո՞ղ են սահմանափակող ֆերմենտները կտրել ՌՆԹ-ն:
Սահմանափակող ֆերմենտները նուկլեազներ են՝ ֆերմենտներ, որոնք կտրում են նուկլեինաթթվի պոլիմերները (այսինքն՝ ԴՆԹ և ՌՆԹ): Այս ֆերմենտների՝ հատուկ տեղամասերում ԴՆԹ-ն կտրելու ունակությունը բակտերիաներին տալիս է իմունային համակարգի մի տեսակ, որը կտրում և, հետևաբար, ապաակտիվացնում է օտար ԴՆԹ-ն, ինչպիսին է վիրուսները:
Ինչպե՞ս են սահմանափակող ֆերմենտները և լիգազան օգտագործվում կենսատեխնոլոգիայում:
Սահմանափակող ֆերմենտները ԴՆԹ կտրող ֆերմենտներ են: ԴՆԹ-ի լիգազան ԴՆԹ-ին միացնող ֆերմենտ է: Եթե ԴՆԹ-ի երկու կտոր ունեն համապատասխան ծայրեր, լիգազան կարող է դրանք կապել՝ ձևավորելով ԴՆԹ-ի մեկ, չկոտրված մոլեկուլ: ԴՆԹ-ի կլոնավորման ժամանակ սահմանափակող ֆերմենտները և ԴՆԹ-ի լիգազան օգտագործվում են գեները և ԴՆԹ-ի այլ մասերը պլազմիդների մեջ մտցնելու համար:
Ինչպե՞ս են օգտագործվում սահմանափակող ֆերմենտները գելային էլեկտրոֆորեզ կատարելիս:
1 Պատասխան. ԴՆԹ-ի, ՌՆԹ-ի կամ պլազմիդի սահմանափակման վայրերում (օրինակ՝ EcoRI, BamHI, hindIII և BglII) կտրելու համար ավելի փոքր գենետիկ բեկորներ ստեղծելու համար, որոնք կարող են առանձնացվել և այդպիսով բնութագրվել գելային էլեկտրոֆորեզի միջոցով: