Ինչի՞ համար է օգտագործվում հակադարձ տրանսկրիպցիոն PCR:
Ինչի՞ համար է օգտագործվում հակադարձ տրանսկրիպցիոն PCR:

Video: Ինչի՞ համար է օգտագործվում հակադարձ տրանսկրիպցիոն PCR:

Video: Ինչի՞ համար է օգտագործվում հակադարձ տրանսկրիպցիոն PCR:
Video: Ուղիղ և հակադարձ համեմատականություն. ներածություն | Հանրահաշիվ | «Քան» ակադեմիա 2024, Նոյեմբեր
Anonim

RT - PCR ( Reverse transcriptase PCR ) RT - PCR է օգտագործված գիտահետազոտական լաբորատորիաներում գեների էքսպրեսիան ուսումնասիրելու համար, օրինակ՝ էկզոնները ինտրոններից տարբերելու փորձերում, և կարող է լինել օգտագործված կլինիկական գենետիկական հիվանդությունների ախտորոշման և դեղորայքային թերապիայի մոնիտորինգի համար:

Հաշվի առնելով սա՝ ի՞նչ է անհրաժեշտ հակադարձ արտագրման համար։

Նախաձեռնել հակադարձ արտագրում , հակադարձ տրանսկրիպտազները պահանջում են կարճ ԴՆԹ օլիգոնուկլեոտիդ, որը կոչվում է այբբենարան, որպեսզի միանա ՌՆԹ-ի կաղապարի իր լրացուցիչ հաջորդականություններին և ծառայի որպես նոր շղթայի սինթեզի մեկնարկային կետ:

Ավելին, ինչո՞ւ է կարևոր cDNA-ն օգտագործել PCR-ի համար: cDNA ունի իր սեփականը նշանակությունը մեջ Պոլիմերազային շղթայական ռեակցիա ( PCR ) տեխնիկա. cDNA հակադարձ տրանսկրիպցիայի արդյունք է ֆերմենտների կողմից, որոնք կոչվում են հակադարձ տրանսկրիպտազներ: Հիմա, լինելով ճշգրիտ պատճենը գենոմային ԴՆԹ , սա cDNA կարող է ծառայել նպատակը կաղապարի ԴՆԹ in vitro ուժեղացման և հետագա վերլուծությունների համար:

Այս կերպ, ո՞րն է տարբերությունը իրական ժամանակի ՊՇՌ-ի և հակադարձ տրանսկրիպտազի ՊՇՌ-ի միջև:

RT - PCR օգտագործվում է ԴՆԹ կոդի հակադարձ տառադարձումն ուժեղացնելու համար. QPCR-ն չափում է ուժեղացումը: 3 RT - PCR ուժեղացման համար է, մինչդեռ qPCR-ն քանակականացման համար է:

Արդյո՞ք cDNA- ն երկշղթայական է:

Ի տարբերություն ՌՆԹ -ի, ԴՆԹ -ի մոլեկուլները կարելի է հեշտությամբ կլոնավորել (դրանք կոչվում են « cDNA կլոններ ') ՝ կազմելով cDNA կրկնակի - խրված և կապվում է վեկտորային ԴՆԹ -ի հետ: ԴՆԹ-ի հաջորդականության վերլուծությունը շատ ավելի հեշտ է, քան ՌՆԹ-ն, հետևաբար. cDNA RNA- ի, մասնավորապես էուկարիոտիկ mRNA- ի վերլուծության էական ձևն է:

Խորհուրդ ենք տալիս: