Ի՞նչ տեղի կունենա, եթե ավելացնեք չափից շատ սահմանափակող ֆերմենտ:
Ի՞նչ տեղի կունենա, եթե ավելացնեք չափից շատ սահմանափակող ֆերմենտ:

Video: Ի՞նչ տեղի կունենա, եթե ավելացնեք չափից շատ սահմանափակող ֆերմենտ:

Video: Ի՞նչ տեղի կունենա, եթե ավելացնեք չափից շատ սահմանափակող ֆերմենտ:
Video: Java Multithreading : AtomicReference, ScheduledExecutorService и монада Either. Многопоточность. 2024, Նոյեմբեր
Anonim

Կարող է առաջանալ թերի մարսողություն երբ չափազանց շատ կամ նույնպես քիչ ֆերմենտ է օգտագործվում. Այն մեջ աղտոտիչների առկայությունը որ ԴՆԹ նմուշ կարող է արգելակել ֆերմենտները , որը նաև հանգեցնում է թերի մարսողության։ Մի քանի սահմանափակող ֆերմենտներ լիարժեք ակտիվության համար պահանջում են կոֆակտորներ:

Բացի այդ, ինչո՞ւ են վերջին անգամ ավելացվում սահմանափակող ֆերմենտները։

Այն սահմանափակող ֆերմենտ սովորաբար այն է վերջին բաղադրիչ ավելացրել է ռեակցիայի՝ ապահովելու համար, որ այն չի ենթարկվում ծայրահեղ պայմանների: Հավաքված ռեակցիան պետք է խառնվի հետո ֆերմենտ հավելում. Խառնել պարունակող բոլոր լուծույթները սահմանափակող ֆերմենտներ նրբորեն խուսափելու համար ֆերմենտ ապաակտիվացում.

Ավելին, ինչպե՞ս կարող է բարելավվել սահմանափակող ֆերմենտի մարսողությունը: Օգտագործեք ոչ ավելի, քան առաջարկվում է ֆերմենտ գումարը (օրինակ՝ 10 միավոր ֆերմենտ մեկ միկրոգրամ ԴՆԹ): Կրճատել գումարը ֆերմենտ անհրաժեշտության դեպքում ռեակցիայի մեջ: Խուսափեք երկարատև ինկուբացիայից մարսողություն ռեակցիա. Օգտագործեք առաջարկվող ռեակցիայի բուֆերը:

Նաև գիտեք, թե ինչու սահմանափակող ֆերմենտը չի կտրվում:

ԴՆԹ-ի պատրաստում, որը պետք է կտրվի պետք է զերծ լինի աղտոտիչներից, ինչպիսիք են ֆենոլը, քլորոֆորմը, ալկոհոլը, EDTA-ն, լվացող միջոցները կամ ավելորդ աղերը, որոնք բոլորը կարող են խանգարել սահմանափակող ֆերմենտ գործունեություն։ Եթե արգելակող (հաճախ աղ, EDTA կամ ֆենոլ) առկա է, վերահսկիչ ԴՆԹ-ն կանի չի կտրել խառնելուց հետո։

Ինչու՞ ֆերմենտի քանակությունը կարող է աստղային ակտիվություն առաջացնել:

Աստղային գործունեությունն է սահմանափակման առանձնահատկությունների թուլացում կամ փոփոխություն ֆերմենտ ԴՆԹ-ի միջնորդավորված տրոհումը, որը կարող է առաջանում են ռեակցիայի պայմաններում, որոնք էականորեն տարբերվում են դրանց համար օպտիմալներից ֆերմենտ . Աստղերի գործունեությունը կարող է տեղի է ունենում Mg-ի առկայության պատճառով2+, ինչպես է երևում է, օրինակ, HindIII-ում:

Խորհուրդ ենք տալիս: