Կարո՞ղ եք հաջորդականացնել PCR արտադրանքը:

2024 Հեղինակ: Stanley Ellington | [email protected]. Վերջին փոփոխված: 2023-12-16 00:18

Ուղղակի Հերթականություն -ից PCR արտադրանք . Միանգամայն հնարավոր է ուղղակիորեն հաջորդականությունը ա PCR արտադրանք առանց բեկորը նախապես կլոնավորելու: Ուղղակի PCR հաջորդականություն հազվադեպ է հաջողակ, եթե դու որոշ ժամանակ տրամադրել դա ապահովելու համար դու մեջ չեն ընկնում մեկ բազմաթիվ թակարդներից:

Այս կերպ, ի՞նչ է PCR-ի հաջորդականությունը:

Ուղղակի Հերթականություն -ից ՊՇՌ Ապրանքներ. Դուք պետք է հեռացնեք բոլորը ՊՇՌ պրայմերներ և չներառված նուկլեոտիդներ մինչև արտադրանքը հաջորդականացված . Հերթականություն օգտագործում է միայն մեկ այբբենարան՝ երկուսի փոխարեն ՊՇՌ . Եթե չհեռացնեք երկու այբբենարանները, ապա կստանաք երկու հաջորդականություններ միմյանց վրա դրված, որոնք ընթեռնելի չեն:

Նմանապես, կարո՞ղ եմ օգտագործել PCR պրայմերներ հաջորդականության համար: PCR պրայմերներ համար նախատեսված են ՊՇՌ ուժեղացում՝ ամպլիկոն ստանալու համար: Հերթականացման այբբենարաններ են օգտագործված դեպի հաջորդականությունը ԴՆԹ-ի հատվածը և բացահայտել դրա ԴՆԹ-ն հաջորդականությունը բացահայտել. 4. Երկու PCR պրայմերներ անհրաժեշտ են ա ՊՇՌ ռեակցիա (սովորաբար); միայն մեկը հաջորդականության այբբենարան ավելացվում է ա հաջորդականություն ռեակցիա.

Հաշվի առնելով սա՝ ինչպե՞ս եք փորձարկում PCR արտադրանքները:

Հայտնաբերում և վերլուծություն PCR արտադրանք . Այն արտադրանքը ա ՊՇՌ պետք է լինի որոշակի երկարությամբ ԴՆԹ-ի հատված կամ բեկորներ: Շատ մեթոդներ կարող են օգտագործվել ուժեղացված հաջորդականությունների հայտնաբերման համար (տես Աղյուսակ): Ամենապարզ և հաճախ օգտագործվող տեխնիկան էլեկտրոֆորեզն է PCR արտադրանք ագարոզայի գելի վրա EtBr-ով (էթիդիումի բրոմիդ):

Ինչու՞ է անհրաժեշտ PCR արտադրանքը մաքրել հաջորդականությունից առաջ:

Մաքրում ԴՆԹ-ից ա ՊՇՌ ռեակցիան սովորաբար լինում է համար անհրաժեշտ ներքևում օգտագործումը և հեշտացնում է ֆերմենտների, նուկլեոտիդների, պրայմերների և բուֆերային բաղադրիչների հեռացումը: