Բովանդակություն:

Ինչպե՞ս եք ընտրում կլոնները:
Ինչպե՞ս եք ընտրում կլոնները:

Video: Ինչպե՞ս եք ընտրում կլոնները:

Video: Ինչպե՞ս եք ընտրում կլոնները:
Video: Արդուկոպտեր մրցարշավային քառակոպտերի վրա: Սա ձեզ համար INAV չէ: Առաջին մաս. Հիմնական կարգավորում 2024, Նոյեմբեր
Anonim

Երբ ընտրելով ա կլոն Համոզված եղեք, որ արմատները ամուր են, սպիտակ և անհամբեր դուրս ցցված աճող միջավայրից: Եթե արմատները շագանակագույն են և ճեղքված, կամ այլ կերպ անգործուն են թվում, ետ դրեք այն և փնտրեք ավելի լավը:

Բացի այդ, ինչպե՞ս եք կլոնավորում մեկ բջիջ:

  1. Հաշվե՛ք բջիջները՝ 200 µL միջավայր պարունակող 96 հորատանցքի ափսեի առաջին հորում (A1) տեղադրելու համար ~16000 բջիջ:
  2. Հեռացրեք 100 մկլ A1 պարունակող բջիջներից և խառնեք B1-ի հետ՝ 3 անգամ պիպերտավորելով վեր ու վար՝ լավ խառնելու համար, նախքան 100 մկլ հեռացնելը և C1-ի հետ խառնելը և այլն:

Բացի այդ, ինչպե՞ս եք ընտրում կաթնասունների բջիջների գաղութը: Տեղադրեք ափսեը մանրադիտակի տակ՝ չտարբերակված առողջ ընտրելու համար գաղութներ . Ընտրեք գաղութներ օգտագործելով P-20 pipette սահմանված 10ul: Զգուշորեն ընտրել ա գաղութ առանց կոտրելու գաղութ միայնակ բջիջները և տեղափոխեք այն տրիպսինով 96 ջրհորանոց ափսեի մեջ: Մի քանի անգամ պիպետ բարձրացրեք և վար՝ ցրելու համար գաղութ.

Համապատասխանաբար, ինչպե՞ս եք օգտագործում կլոնային բալոն:

Օգտագործելով ստերիլ միջին աքցան, վերցնել ա կլոնավորման գլան . Նրբորեն սեղմեք հարթ հատակին գլան հարթ սիլիկոնե քսուքի մեջ և հանկարծակի ուղղահայաց շարժումով հանել: Եթե դա ճիշտ արվի, դա թույլ կտա հավասարաչափ բաշխել քսուքը ներքևի մասում գլան . Սահմանել գլան գաղութի վրայով։

Ինչպե՞ս եք ընտրում գաղութները կայուն բջջային գծերի համար:

Կայուն բջջային գծեր ստեղծելու արձանագրությունը պահանջում է մի քանի քայլ, ինչպես ցույց է տրված ստորև

  1. Ստեղծեք սպանության կոր՝ որոշելու հակաբիոտիկների ընտրության օպտիմալ կոնցենտրացիան:
  2. Բջիջները փոխակերպել ցանկալի պլազմիդային կոնստրուկտ(ներով)
  3. Ընտրել և ընդլայնել կայուն պոլիկլոնային գաղութները:
  4. Բացահայտեք միայնակ կլոնները սահմանափակ նոսրացման և ընդլայնման միջոցով:

Խորհուրդ ենք տալիս: